Повноцінні мишачі яйцеклітини виростили «в пробірці»

Японським вченим вдалося виростити повноцінні мишачі яйцеклітини в повністю штучних умовах. Результати роботи опубліковані в журналі.


Співробітники Токійського сільськогосподарського університету з колегами з інших вишів на 13-й день після запліднення забрали у мишачих ембріонів жіночої статі гоноцити. Ці первинні статеві клітини, що мають диплоїдний (подвійний) набір хромосом, зароджуються в жовточному мішку. Під час ембріонального розвитку вони мігрують до статевих залоз, де під впливом вироблених тими факторів проходять всі етапи мейозу з утворенням яйцеклітин, які мають гаплоїдний (одинарний) набір хромосом.


Отримані гоноцити помістили в інкубатор з клітинами яєчників, що забезпечують зріст і дозрівання фолікулів з яйцеклітинами. Попередні спроби призводили до утворення деформованих або кластеризованих статевих клітин, непридатних для запліднення. Досі дозрівання вдавалося домогтися тільки шляхом імплантації частково дозрілих клітин в організм тварини.

Аналіз експресії генів секвенуванням РНК, проведений японцями, виявив у вирощуваних яйцеклітинах підвищену експресію 547 генів. З'ясувалося, що її викликає ненормальна активація естрогенових рецепторів (вона пов'язана з роботою сигнальних шляхів бета-естрадіола, транскрипційного фактора SP1 і бета-катеніна). Щоб нормалізувати зростання фолікулів, вчені заблокували ці рецептори штучним антагоністом (ICI 182780), додаючи його в живильне середовище клітин.

На 17 день вторинні фолікули з яйцеклітинами перенесли на ізольовані середовища з додаванням фолікулостимулюючого гормону (для нормального розвитку) і полівінілпірролідону (для підтримки цілісності клітинних комплексів). До 26 дня у фолікулах з'явилися популяції стероїдогенних клітин, що синтезують статеві гормони, як естрогенового, так і гестагенного ряду.

З 29 по 33 день культивації в яйцеклітинах за допомогою гонадотропінів і епідермального фактора зростання індукували другий поділ мейозу, що призводить до формування повноцінних яйцеклітин. Близько половини отриманих клітин вдалося успішно запліднити. Через добу ембріони, які досягли стадії двох клітин, перенесли для виношування самкам мишей. Від 14 до 40 відсотків ембріонів розвинулися в здорових мишатах, що нічим не відрізняються від зачатих природним шляхом. У помітах було до семи тварин, що відповідає нормальному показнику.

Метою експерименту стало отримання повноцінної моделі розвитку яйцеклітини для вивчення цього процесу. Крім того, в майбутньому ця технологія може допомогти в розробці нових методів лікування жіночого безпліддя.

У лютому 2016 року китайські дослідники змогли виростити «в пробірці» мишачі сперматозоїди, що підходять для екстракорпорального запліднення.


COM_SPPAGEBUILDER_NO_ITEMS_FOUND